DIG-切口平移混合物

说明

一般描述

DIG-缺口平移混合物是用于缺口平移的方便的酶和核苷酸混合物。其利用DNA酶和DNA聚合酶的组合来切割DNA螺旋的一条链，然后在聚合酶检查或“校对”切口位点时掺入标记的核苷酸。大质粒、粘粒和聚合酶链式反应(PCR)片段都常用于该方法，同时DNA可以是线性化或超螺旋的。单个模板在标准的90分钟反应中可产生一致的结果，并且生成的平均探针长度为200bp，最多为500bp。调整地高辛配基(DIG)-11-三磷酸脱氧尿苷(dUTP)与三磷酸脱氧胸苷(dTTP)的摩尔比，以确保新合成的DNA中每20至25个核苷酸被DIG修饰。DNA中这一半抗原的密度可在免疫检测反应中产生最高的灵敏度。

应用

DIG-缺口平移混合物用于生成高灵敏度的地高辛-11-dUTP标记原位杂交探针。
注意：该混合物也可用于过滤杂交技术，但是，对于高灵敏度的过滤杂交探针，我们建议您使用Roche Applied Science的DIG-High Prime。
对于使用其他半抗原和荧光团的非放射性标记原位探针，Roche Applied Science提供了Biotin-切口平移混合物和切口平移混合物（无核苷酸）。