说明
一般描述
组分
Protector RNase抑制剂(40 U/μl)储存液:20 mM HEPES-KOH,50 mM KCl,8 mM 二硫苏糖醇, 50% 甘油(v/v)pH 7.6左右(+4°C)。
Protector RNase抑制剂可广泛灭活各种RNase,包括
RNase A
RNase B
RNase T2
因此,Protector RNase抑制剂可在任意存在RNases污染问题的应用中防止RNase降解。例如,其可以:
在cDNA合成反应RT-PCR期间或体外转录/翻译反应过程中保护mRNA(在传统热循环和qPCR系统中)
在体外病毒复制期间保护病毒RNA
在RNA分离纯化期间抑制核糖核酸酶
用于RNase保护测定
帮助制备不含RNase的抗体
注意:Protector RNase抑制剂通常不会影响用于制备或分析RNA的酶。
特异性
Protector RNase抑制剂完全不会对RNase T1与RNase 1造成影响。
Protector RNase抑制剂(20 U/ 20 μl反应)能够抑制多达1 ng RNase A,160pg RNase B以及0.03 U/μl(反应体系)RNase T2的活性。
RNase H的活性不受Protector RNase抑制剂的抑制。
热灭活:> 65 °C
应用
Protector RNase抑制剂可用于:
在cDNA合成反应RT-PCR中保护mRNA(在传统热循环和qPCR系统中)例如,通过LightCycler®设备、体外转录/翻译系统、RNase保护测定、体外RNA合成等[1][2]
在体外病毒复制期间保护病毒RNA
在RNA分离纯化期间抑制核糖核酸酶[3][4]
帮助制备不含RNase的抗体
合成用于原位杂交的RNA探针[5][6]
可在任意RNase可能造成潜在问题的应用中发挥作用。
特点和优势
基于热稳定性的RNase抑制剂:即使使用热稳定性逆转录酶(如Transcriptor逆转录酶)的条件下,Protector RNase抑制剂仍保持稳定。
兼容广泛的反应条件:Protector RNase抑制剂在pH 5.0至9.0条件下和+25°C至+55°C的温度下都具有活性(+60°C时仍保留部分活性)。
避免各种RNA分析应用中的干扰:即使升高到标准浓度的16倍仍保持正常效能。
持续提供高纯度产物:每一批次的产品都进行严格质控流程,经实时定量RT-PCR等标准技术检测,确保不含核酸内切酶、核糖核酸酶或切割活性。