抗-蛋白C亲和基质

说明

一般描述

蛋白C是维生素K依赖性血浆酶原，由凝血酶-凝血酶调节蛋白复合物通过蛋白水解裂解激活，形成抗凝酶。[1]抗-蛋白C小鼠单克隆抗体（克隆号HPC4）可特异性结合含蛋白C凝血酶切割位点的表位序列，并已固定化。抗-蛋白C抗体识别编码蛋白C重链6-17个残基的12氨基酸序列(EDQVDPRLIDGK)。抗-蛋白C抗体/蛋白C表位复合物需要在钙离子存在的条件下形成。在Ca2存在下，该抗体高亲和与高特异性地结合天然人蛋白C或带有该表位的蛋白质中的这一序列。无论该表位位置如何（N末端、C末端或内部），重组融合蛋白均可进行高效结合。因此，这种独特抗体尤其适合纯化带蛋白C表位标记的重组融合蛋白。

插入的蛋白C标记没有引入新的金属离子结合位点。Ca2+结合位点在抗体上。

蛋白C标记可任意掺入到融合蛋白的N端、C端或内部位置，而不会对抗体特异性有任何影响。

使用经济的钙螯合剂（如EDTA）或专用的蛋白C标记肽，可在非变性的温和洗脱条件下进行快速地免疫亲和纯化。

抗-蛋白C小鼠单克隆抗体（克隆号HPC4）可共价偶联琼脂糖珠。在偶联反应中，4mg抗体和1ml珠子反应。

特异性

抗蛋白C抗体识别编码蛋白C重链6-17个残基的12氨基酸序列EDQVDPRLIDGK。在Ca2存在下，该抗体高亲和与特异性地结合天然人蛋白C或标记该表位的蛋白质中的这一序列。无论该表位位置如何（N末端、C末端或内部），重组融合蛋白均可进行高效结合。

应用

抗-蛋白C亲和基质可用于：

来自哺乳动物、细菌和酵母细胞提取物的蛋白C标记蛋白的免疫沉淀[2]

蛋白粗提液来源蛋白C标记蛋白的亲和柱纯化

特点和优势

洗脱条件温和，采用EDTA等钙螯合剂。

对蛋白C来源的EDQVDPRLIDGK序列具有高特异性。

抗蛋白抗体与蛋白C表位的结合依赖于钙离子的存在。

无论融合的蛋白C标记位于N末端、C末端还是内部，融合蛋白均适合进行纯化。

适用于来自哺乳动物、细菌和酵母表达系统的细胞粗提液。