说明
一般描述
FastStart™ Universal SYBR® Green预混液(Rox)是一种用于qPCR和RT-qPCR的即用型热启动反应混合物,适用于所有需要用ROX标准化的实时荧光定量PCR系统。
SYBR® Green I是一种DNA双链特异性染料。在DNA合成的每个阶段,包含在反应液中的SYBR® Green I染料可与扩增的PCR产物相结合。扩增子可通过荧光检出。
热启动实验方案经证可大幅提升特异性、灵敏度及PCR得率。在FastStart™ Taq DNA聚合酶的某些氨基酸残基上的热不稳定性封闭基团使得修改后的酶在室温(+15至+25°C)没有活性。因此,在引物可以非特异性结合的阶段并没有发生延伸。FastStart™ Taq DNA聚合酶可在高温(如在+95°C的预孵育步骤)下通过将封闭基团去除而被激活。
应用
FastStart™ Universal SYBR® Green预混液(Rox)可用于任何DNA或cDNA靶标(包括高GC或AT含量靶标)的扩增和检测。
将预混液与Transcriptor First Strand cDNA合成试剂盒(Roche)结合以在两步法qRT-PCR中实现极-佳的结果。
FastStart™ Universal SYBR® Green预混液(Rox)已用于qRT-PCR和RT-PCR。