一般描述
KAPA2G快速多重PCR试剂盒含有定向进化改造的二代(2G)酶。KAPA2G FAST HotStart®快速热启动DNA聚合酶是专为提高持续合成能力和速度而设计的抗体介导热启动酶,与野生型Taq聚合酶相比,其提供了更快的延伸速率。除速度外,KAPA2G快速聚合酶比竞争对手的酶具有更高的产量和灵敏度,从而可实现一致性更高的多重PCR。
KAPA2G快速热启动DNA聚合酶试剂盒设计用于快速PCR,与使用野生型Taq DNA聚合酶进行的常规PCR分析相比,总反应时间能够缩短20–70%。这可以在不牺牲反应性能的情况下实现,并且不需要专门的PCR耗材或热循环仪。
应用
KAPA2G 快速多重混合液已用于:
转基因生物的分型
微卫星扩增
病原体的分型和检测
用于单核苷酸多态性(SNP)基因分型的多个DNA-片段的扩增
半定量PCR
三重PCR
生化/生理作用
KAPA2G快速DNA聚合酶产生的DNA-片段与野生型Taq聚合酶的DNA-片段有相同的表征,可用于测序、限制性酶切和克隆。 同野生型Taq聚合酶一样,KAPA2G快速聚合酶具有5′→3′聚合酶和5′→3′外切酶活性,但不具有3′→5′外切酶(校正)活性。KAPA2G快速聚合酶的保真度类似于Taq聚合酶;每1.7 x 105核苷酸的错配数约为1个。PCR产物是3′-dA尾的,可以克隆到TA克隆载体中。
特点和优势
提高灵敏度、特异性和产量
所有扩增子表示统一表示
具有困难、富含 GC 靶标的成功多重 PCR