一般描述
DIG High Prime DNA标记及检测起始试剂盒I使用类固醇半抗原地-高辛(DIG)，通过酶促免疫检测标记DNA探针标记，以便进行杂交和后续显色检测。此试剂盒包含即用型封闭液——由硝基四氮唑蓝（NBT）/ 5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯(BCIP和DIG Easy Hyb颗粒组成的综合储备液。DIG-High Prime混合物包括稳定的Klenow酶、核苷酸、引物和反应缓冲液——所有成分均溶于一种方便的试剂中。样品材料可以是：至少100 bp的DNA-片段，线性化质粒，cosmid或λ DNA，或超螺旋DNA“随机结合的”DNA标记方法首先由Feinberg和Vogelstein开发，基于将所有可能序列的寡核苷酸杂交至待标记的变性DNA。初始加入的DNA仅作为标记DNA的合成模板，在反应过程中不会降解，因而可标记极少量的DNA（10 ng）。该方法借助Klenow聚合酶，以随机寡核苷酸的3′-OH末端为引物，合成互补DNA链。反应物中存在洋地黄-毒苷标记的修饰脱氧核糖核苷三磷酸掺入新合成的互补DNA链中。这种便捷的试剂盒可通过碱不稳定的DIG-11-dUTP随即引发标记DNA模板，显色检测DIG标记杂交产物。
应用
DIG-High Prime DNA标记和检测起始试剂盒I已用于多种杂交技术：
Southern印迹
Nrthern印迹
斑点印迹
菌落和噬菌斑杂交
所有类型的过滤杂交
总基因组DNA的单拷贝基因检测，甚至可检测高度复杂的生物体样品，如人类、大麦和小麦
一小时或过夜孵育后，DIG 标记的探针产量很高。
包装
1个试剂盒包含7种组分。
质量
已通过斑点杂交试验测试功能。
其他说明
仅用于生命科学研究。不用于诊断操作。
