说明
一般描述
KAPA SYBR ®快速qPCR 试剂盒包含通过定向进化改造的 DNA 聚合酶，以更耐受 SYBR Green I 染料抑制。
KAPA SYBR快速qPCR试剂盒具有提高的耐用性、加工性和速度，使得始终保持较高水平扩增效率，使基因表达分析的相对定量更加准确。KAPA SYBR快速qPCR试剂盒在严格的实时PCR反应条件下性能较好，在信噪比（荧光）、循环域值 (Cq)、线性度和灵敏度方面都有显著改善。
应用
KAPA SYBR® FAST已可用于：
基因表达
基因敲除验证
微阵列验证
ChIP分析
低拷贝检测
实时定量PCR[1][2]
特点和优势
更准确地定量基因表达的变化
95-105％ 之间的高反应效率可提高准确性和可重复性。
广泛 GC 含量和扩增子长度范围内的无偏效率。
持续检测低拷贝和困难靶标
进行性改善导致早期 Cq 评分。
在不同 AT 和 GC 含量的靶标上进行更高的荧光检测。
新型酶能抵抗 SYBR ®抑制。
仅需 40 min 即可完成实时 PCR 运行
快速循环方案的运行时间缩短 55%。
从标准协议切换到快速协议时保持高性能。
临时速记：
该试剂盒包含一种使用 SYBR Green I 染料化学方法优化 qPCR 的工程酶。
2X 预混液含有专有缓冲液。与新型酶一起，提高了富含GC和AT的靶的扩增效率。
95°C 下 20 s 的初始变性足以激活酶。 使用复杂模板时，建议将初始变性设置为 3 min。
对于 3 步循环，引物退火用 20秒，72°C 下延伸/数据采集用 1 秒。
反应体积不得超过 25μL。
质量
所有试剂盒组份均经过严格的功能性质量控制，不存在可检测到的污染外切和内切酶活性，并满足严格的DNA污染要求。
制备说明
总是确保所有的组份在使用用彻底溶解并充分混合。KAPA SYBR ®Fast qPCR Master Mix (2X) 即使在-20°C 下储存，也可能无法冷冻。
KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) 中包含的 SYBR Green I染料和ROX/荧光素染料（取决于试剂盒配置）具有光敏性。 长时间暴露在直射光下会导致荧光信号强度下降。
KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) 经过30个冻融循环后仍稳定。当不使用时，确保所有试剂在-20°C的温度下避光储存。如果不被微生物和/或核酸酶污染，试剂在避光的情况下，在4°C的黑暗环境中稳定至少一个星期，并可在这个温度下储存以短期使用。
