5′/3′ RACE试剂盒，第2代

说明

一般描述

cDNA末端快速扩增(RACE)是一种用于从部分已知序列快速获得全长cDNA的常用技术。5′/3′ RACE试剂盒包含转录物逆转录酶和重组末端转移酶。转录子逆转录酶可转录全长cDNA，用于高达14 kb的55′或3′ cDNA片段的高灵敏度和快速扩增。其具有热稳定性（高达+ 65°C），适用于具有高二级结构的高GC含量模板。使用转录物逆转录酶可以实现高灵敏度，从而实现高效的cDNA合成和长RACE产物的获得。重组末端转移酶用于将同聚A尾添加至cDNA的3′末端。poly(A)+尾可降低oligo(dT)-锚定引物所产生的不适当截短的可能性，并且可以克服相较于G / C来说较弱的A / T杂交问题.此外，在oligo(dT)-锚定引物可以与内部位点进行杂交并且截短扩增产物之前，需要一段更长的A残基片段。使用基因特异性引物和oligo(dT)-锚定引物通过PCR扩增加尾cDNA。使用嵌套的特异性引物和PCR锚定引物，通过第二次PCR进一步扩增所获cDNA，从而将RACE产物克隆到合适的载体中以用于后续研究。

特异性

热灭活：终端转移酶：70°C，10分钟
转录物逆转录酶：85°C，5分钟

应用

第二代5′/3′ RACE试剂盒适用于

RNA分子的结构和表达研究

生成全长cDNA

从低拷贝RNA信使中分离和鉴定5′或3′末端

第一链cDNA合成

扩增和进一步克隆稀有mRNA

与外显子捕获方法结合使用

RACE反应产物无需克隆即可直接测序